实验项目八十七：ABI7500 实时荧光 PCR 仪鉴定沙门氏菌

1.实验介绍

本实验通过鉴定沙门氏菌实验来熟悉实时荧光 PCR 仪的使用方法以及 PCR 预混合液的制备方法。具体内容包括：预混合液的制备：按照一定的量分别加入 2X Taqman mix、前引物和后引物、TaqMan 探针并混合均匀；加样：将预混合液 加入 96 孔板中，同时在加入阴性对照、阳性对照、空白对照和待检样本；PCR 仪设定条件并测定。

2.功能

1，操作模式：自由操作实验，能在三维场景内自主漫游，通过菜单的方式 来触发操作步骤。操作正确与错误都有操作提示，并实时显示当前得分。2，实 时评分：在操作模式下可以实时看见当前操作分数。评分采用逆序扣分的方式， 单机版和网页版均能实现实时评分。3，易错点提示：该部分为老师在长期的教 学中总结出的经验，或者本实验特别重要的步骤，软件以弹出动画或者图片的形 式，让学员注意细节和关键点。4，辅助功能：具有仪器资料、操作规程、实验 原理、速度设置、模式选择等实验相关知识描述，实验报告可编辑。

3.效果

本实验使学生熟悉实时荧光 PCR 仪的使用方法，实时荧光 PCR 仪价格比较 昂贵，许多学校该设备数量有限，而 PCR 实验是现代分子生物学必须是掌握的 实验技术，通过鉴定沙门氏菌实验来熟悉实时荧光 PCR 仪的使用方法以及 PCR 预混合液的制备方法，让学生对微生物分子鉴定和荧光 PCR 实验有交深刻的掌 握。

图 1  仿真实验界面